English
Seguridad Biológica y Bioética
Consultar la documentación del Comité de Bioseguridad-OEBA en intranet.
La Plataforma para el Estudio de la Conducta (PEC) es una acción estratégica emprendida por el IN para responder a uno de los mayores desafíos actuales en la neurociencia: entender cómo comportamientos animales, en condiciones normales y/o patológicas, emergen de la función de circuitos neuronales interconectados.
Dentro de la PEC los animales se estabulan en racks ventilados lo que minimiza el ruido y estrés ambiental, aumentando el bienestar de los roedores y la eficiencia y reproducibilidad de los experimentos. Además, la estabulación en jaulas de enriquecimiento también está disponible.
La PEC posee ocho salas diversamente equipadas permitiendo al usuario desde la caracterización conductual básica de líneas mutantes y wild types, hasta la evaluación de aspectos concretos del comportamiento social, ansiedad y depresión, sueño, aprendizaje y memoria, o habilidades motoras. El equipamiento disponible incluye video tracking Smart V3, Erasmus Ladder, Morris water maze, Phenotyper, Touch-screen, Cold/Heat plate, Treadmills y cajas operantes para el miedo condicionado, entre otros.
SERVICIOS:
- Asistencia técnica para la utilización de los equipos y software disponibles en el servicio.
- Asistencia en el análisis y procesamiento de los datos adquiridos.
- Asesoramiento en la elección y/o diseño de la prueba de comportamiento que más se adapte a las necesidades del usuari@.
- Mantenimiento y gestión de reparaciones de los equipos.
- Elaboración de manuales y asistencia en la redacción de materiales y métodos para publicaciones.
- Organización y difusión de cursos de especialización en comportamiento y workshops sobre nuevos equipos o test disponibles.
- Valoración y asesoramiento en la adquisición de nuevo equipamiento.
- Participación en actividades de divulgación.
Las comunicaciones del servicio se llevarán a cabo a través de lista de distribución: in.pec@listas.umh.es
Las consultas se realizarán preferentemente por correo electrónico a: in.pec@umh.es
REQUISITOS DE ACCESO
1.- Se ha de recibir formación específica en materia de bioseguridad. Dicha formación será impartida por el personal del animalario previa solicitud en el correo g.moreno@umh.es.
2.- Es imprescindible disponer de la acreditación de la función C (ECC/566/2015) para realizar procedimientos en las instalaciones de la PEC.
3.- El usuario debe darse de alta en: in.pec@listas.umh.es, a través de la web: https://listas.umh.es/sympa/info/in.pec. Desde esta lista se realizarán las comunicaciones referentes a la PEC.
4.- El horario de entrada al animalario es de 8:00 a 20:00. Para accesos fuera de este horario y/o durante el fin de semana es necesario notificarlo previamente a g.moreno@umh.es e in.pec@umh.es, así como registrarse en conserjería.
5.- Para acceder y trabajar en la zona experimental del animalario es obligatorio desvestirse y usar la ropa específica de trabajo del animalario, así como mascarilla, gorro y guantes.
6.- Está totalmente prohibido introducir a la zona experimental (salas 1 a 7) elementos del exterior, esto incluye papeles/libreta, bolígrafos, teléfono móvil, cascos, animales, etc.
7.- La plataforma para el estudio de la conducta posee dos áreas de trabajo con diferente nivel de seguridad biológica por lo tanto el flujo de trabajo debe cumplir las siguientes restricciones:
8.- No está permitido el uso simultáneo de la PEC y otro animalario (edificio Alberto Sols) o sala de alojamiento de animales (2ª planta IN). Ante cualquier duda o necesidad específica en relación con esta norma contactar con g.moreno@umh.es e in.pec@umh.es.
9.- La ocultación de información conllevará la restricción de acceso a las instalaciones de la PEC, por lo tanto ante cualquier duda o necesidad contactar con in.pec@umh.es.
Para utilizar las instalaciones de la PEC se ha de rellenar el formulario de uso y realizar la reserva pertinente a través de la página web del instituto. Solo podrán llevarse a cabo procedimientos autorizados por la autoridad competente.
Los equipos alojados en salas 1, 2, 4, 5, 6 y 8 son intransferibles. El resto de material y equipos de la PEC se guarda en el almacén o en la sala 2 y pueden trasladarse únicamente a las salas 2, 3 y 7 para su uso.
Está prohibido cambiar la ubicación de los equipos asociados a una sala específica sin autorización previa del personal técnico (solicitar a in.pec@umh.es). Asimismo, se prohíbe la entrada o salida de equipamiento sin autorización previa.
La configuración de las conexiones entre equipos y con la corriente eléctrica es fija y no puede modificarse. Si el/la usuari@ necesita conectar algún otro equipo, cada sala dispone de al menos un enchufe libre y/o una regleta. En caso de necesitar cambiar la configuración establecida solicite permiso a in.pec@umh.es.
Cada sala está dotada de materiales de uso común que son intransferibles a otras salas (papel, ETOH 70%, elementos de papelería, etc.). Si alguno de estos elementos está próximo a terminarse o se ha extraviado, informe a in.pec@umh.es.
El titular de la reserva es el responsable del estado del equipamiento durante ese periodo y debe asegurarse de que la habitación y el equipo estén en orden y limpios después de su uso.
El ruido puede afectar los resultados de las pruebas de comportamiento por lo tanto l@s usuari@s deben realizar los procedimientos con las puertas cerradas y evitar hablar en los pasillos.
Cuando se esté trabajando en la sala de comportamiento se ha de girar el cartel disponible en la puerta que indica “experiment in progress” y volver a girarlo una vez se abandone la sala.
No se permite alojar animales en las salas de comportamiento sin previa autorización del personal técnico. Para solicitar dicha autorización se ha de rellenar el formulario disponible para ello en esta web alojamiento temporal
La habituación de los animales a la sala de trabajo ha de hacerse en el horario reservado y en la sala reservada. Si el test de comportamiento no lo permite (excesivo ruido, escaso espacio, …) no se permite la reserva de salas anexas para la manipulación y/o habituación de los animales. En este caso, los animales se trasladarán desde la sala de estabulación a la sala reservada directamente, pudiendo hacer la transferencia del animal seleccionado a una caja individual en la campana.
Los archivos creados durante los experimentos deben transferirse electrónicamente a ordenadores externos (por correo electrónico, Google drive, Dropbox, etc.). Una vez que se haya comprobado la correcta recepción y funcionamiento de los archivos en el ordenador externo deben eliminarse de los ordenadores de la PEC.
La conexión en remoto a los ordenadores de la PEC se permite siempre y cuando no haya una reserva en curso de la sala.
L@s usuari@s de la PEC son responsables de comprobar el correcto etiquetado de sus jaulas alojadas en la zona experimental, así como de actualizar el código procedimental que aparece en la tarjeta si fuese necesario.
Toda incidencia deberá notificarse por correo electrónico a in.pec@umh.es.
RESERVAS
Las salas de la PEC deben ser reservadas a través de la INTRANET antes de su uso. Las salas se podrán reservar en bloques de 2, 3 ó 6 horas en función de la sala seleccionada, hasta un máximo de cuatro semanas consecutivas. Sin embargo, aquellas reservas que ocupen completamente el horario de trabajo de una sala podrán tener una duración máxima de una semana consecutiva. Para reservas que no se ajusten a la duración/requisitos indicados, contactar directamente con el personal técnico en: in.pec@umh.es
Una vez realizada la/-s reserva/-s a través de la intranet, el usuario debe completar el documento disponible en esta web: formulario de uso. Se podrán agrupar en un único formulario varias reservas de una misma sala siempre y cuando, se trate del mismo código procedimental y la misma cohorte. En caso de no rellenar dicho formulario, no se hará efectiva la reserva de la sala y, por lo tanto, el/la usuari@ no podrá hacer uso de las instalaciones y equipos de la PEC.
El horario de acceso y uso de las instalaciones de la PEC es de 8 a 20 de lunes a viernes. En caso de que se requiera acceso durante el fin de semana o pasadas las 20, será necesario notificación previa a g.moreno@umh.es e in.pec@umh.es, así como registrarse en conserjería.
Para cualquier cambio o liberación de salas escribir a in.pec@listas.umh.es.
La plataforma para el estudio de la conducta (PEC) está conformada por una amplia zona de trabajo y estabulación ubicada en el sótano del Instituto de Neurociencias (edificio Santiago Ramón y Cajal), dentro del RMG, además de una sala anexa (sala 8) situada también en el sótano, cerca del área de resonancia.
Las instalaciones ubicadas dentro del RMG (imagen adjunta) son las siguientes:
- Área de estabulación.
- Almacén.
- Sala 1. ErasmusLadder + qOMR
- Sala 2. Video + multiuso
- Sala 3. Videotracking + multiuso
- Sala 4. Morris water maze
- Sala 5. Startle and fear conditioning boxes
- Sala 6. Phenotyper
- Sala 7. Videotracking + multiuso
- Responsable científico:
Isabel Pérez Otaño – email: otano@umh.es
- Responsable del animalario:
Gonzalo Moreno del Val – email: g.moreno@umh.es
- Responsable técnico:
Ariadna Díaz Tahoces – email: adiaz@umh.es
Las consultas específicas o relacionadas con las reservas e incidencias se deben realizar por correo electrónico a: in.pec@umh.es
Las comunicaciones del servicio se llevarán a cabo a través de la lista de distribución de la UMH: in.pec@listas.umh.es
Contacto:
Plataforma para el estudio de la conducta
Instituto de Neurociencias
Universidad Miguel Hernández – CSIC
Av. Santiago Ramón y Cajal s/n
03550 Sant Joan d’Alacant (Spain)
E-mail: in.pec@umh.es
Resp. científico / técnico:
Gonzalo Moreno
–
Técnico:
Patricia Muñoz
El Servicio de Transgénicos y Criopreservación ofrece servicios especializados de biotecnología reproductiva de ratones. Realizamos técnicas de reproducción asistida (fecundación in vitro) para asegurar la conservación de cepas infértiles y/o en peligro de extinción, rederivación aséptica por transferencia de embriones para mejorar el estado sanitario de cepas contaminadas, importación/exportación de cepas con material criopreservado o refrigerado, criopreservación y archivo de cepas, y generación de nuevos modelos modificados genéticamente mediante técnicas de transgénesis clásica aditiva o mutagénesis dirigida.
El servicio cuenta con el siguiente equipo especializado:
(texto en English)
- Heated dissecting microscopes.
- Classic and benchtop CO2 incubators for In Vitro Fertilization.
- Controlled-rate freezing unit.
- Inverted Microscope with antivibration system, Eppendorf´s micromanipulators and Femtojet injector.
- ESPACE 151 liquid nitrogen tank for safe storage of samples with auto filling system.
The services we offer are:
- Sperm and Embryo Cryopreservation.
- In vitro fertilization (IVF).
- In vivo sampling of epididymal sperm.
- Aseptic rederivation by embryo transfer.
- Strain rescue.
- Strain speed expansion through IVF.
- Revitalizing of cryopreserved or refrigerated gametes and embryos.
- Strain Import/Export by sperm, embryos or epididymis.
- DNA or RNA pronuclear/cytoplasmic microinjection.
(texto en English)
Cryopreservation offers the opportunity of archiving valuable laboratory mice strains such as inbred or genetically modified mice, slowing down the onset of genetic drift and insuring them against any natural or sanitary disaster, mismanagement, reproductive problem, or transgene silencing expression.
The use of cryopreservation in this area also represents a good opportunity to apply the 3Rs policies, since on the one hand is an indirect method of reduction by avoiding the loss of these lines and therefore avoiding a new investment of animals in its creation, but on the other hand offers the possibility of directly reducing the number of animals used in research by archiving and eliminating strains that are kept alive but nevertheless are not being used. In this sense, cryopreservation is also a mechanism that makes possible the good management of the animal facilities since the elimination of obsolete lines is cost-effective (Table 1) and not only reduces the total maintenance costs of animals, but releases space that is being wasted and could be used by other developing research lines.
In short, cryopreservation prevents us from losing our model, ensures its quality, is an opportunity to apply the 3Rs and reduce the number of animals used in research, and is also advisable from an economic and management point of view.
Table 1. Ratio of Laboratory mice strains maintenance costs depending on whether they are kept alive or cryopreserved.
El Servicio de Transgénicos del Instituto de Neurociencias CSIC-UMH proporciona apoyo a investigadores para la generación y establecimiento de modelos de ratón modificados genéticamente. Nuestro equipo ofrece asesoramiento técnico sobre la mejor estrategia para conseguir el modelo deseado mediante transgénesis aditiva o mutagénesis dirigida.
El laboratorio está ubicado dentro de una barrera SPF y el trabajo se realiza en condiciones asépticas, asegurando el mejor estado sanitario para las nuevas cepas generadas.
Técnico responsable: Gonzalo Moreno Del Val
email: g.moreno@umh.es »
Técnico: Patricia Muñoz Robledano
email: pmunoz@umh.es »
Transgénicos y Criopreservación
Instituto de Neurociencias
Universidad Miguel Hernández – CSIC
Campus de San Juan
Sant Joan d’Alacant
Alicante | España
Tel. + 34 965 23 37 00
(ext. servicio 9371 / 9408)
Fax + 34 965 91 95 61
Resp. científicos / técnico:
Juan Antonio Moreno
El alojamiento RMG del Instituto de Neurociencias es un lugar de barrera donde los ratones experimentales se mantienen en condiciones controladas de temperatura, humedad, ciclos de luz y SPF. Está dividido en dos zonas: una destinada a la cría y mantenimiento de los ratones y otra zona experimental con dos quirófanos y siete boxes de comportamiento. Los dos quirófanos están totalmente equipados con todo el material necesario para realizar manipulaciones cerebrales (electroporaciones, inyecciones de virus) y distintos procedimientos experimentales en ratones (cirugías, administración de fármacos, toma de muestras, pesaje, etc). En suma, estas salas cuentan con tres sistemas de anestesia por inhalación, dos UCI, endoscopios, básculas para pesar, microcentrífugas, fuentes de luz, placas calefactoras, dos nanoinyectores, un electroporador y un estereotáxico.
- Es obligatorio que los nuevos usuarios reciban la formación correspondiente por parte del personal de la Instalación antes de utilizar cualquiera de estos equipos.
- El área de trabajo debe mantenerse siempre limpia, especialmente después de finalizar la sesión.
Este servicio está ubicado en el piso sótano del IN y está dividido en:
- Sala de operaciones 1
- Sala de operaciones 2
(texto en English)
Electroporator CUY21 SC. Nepa Gene
The CUY21 SC can measure the electric current from the low ampere (1mA) up to
1.60A. The CUY21 SC was developed for the electroporation of genetic
constructs that are delivered into the sensitive target region such as mouse’s
brain, tissue slices and embryos (chick, mouse). The CUY21 SC can be used with
different NEPA GENE’s CUY series electrodes to perform a wide range of
electroporation experiments. In our animal house there are the CUY650P3 and
CUY650P5 Tweezers w/3mm or 5mm diameter platinum disk electrode (Nepa Gene
Co., Ltd.)
Estereotaxic Stoelting 51730
Carry a basic stereotaxic frame, together with all the usual accessories.
Precision alignment ensures accurate placement of electrodes, micropipettes,
and other devices. Is ideal for researchers in need of a versatile, reliable
instrument for stereotaxic procedures with mice and other small rodents.
Nano injector. NANOLITER 2010-WPI
The Nanoliter Injector offers significant options and controls ideal for
ultra-delicate work with oocytes, embryos, and tissues. Injection volumes
range between 2.3 nanoliters and 69.0 nanoliters in 16 selectable increments.
Vetario TS INTENSIVE CARE UNITS
Designed for helping the recovery of mice after an experimental procedure. It
avoids the hypothermia, shock and other complications derived from the
experimental procedure performed.
Resp. científicos / técnico:
Berta López
1. Para el uso de los equipos es necesaria la reserva a través de la intranet del sitio web del IN sistema de reservas intranet
2.Para el equipo de anestesia común de isofluorano, se asigna un máximo de 16 horas por grupo de investigación en horarios restringidos (9.00 a 18.00 horas).
3. Fuera del horario de uso restringido, no existe restricción en la reserva de franjas horarias aunque éstas deberán ser siempre anotadas
4.La cancelación de reservas antes de un día se puede realizar a través de la página web. Las cancelaciones el mismo día que se reserva el equipo se deben hacer por correo electrónico a in.personal para liberar el cupo(mail: in.personal)
5. El área de trabajo debe mantenerse limpia, particularmente después de finalizar la sesión.
6. Cualquier duda, contactad con el responsable del servicio.
7. Uso del equipo de anestesia:
-Los depósitos de isofluorano deben llenarse por completo (hasta la línea superior) una vez finalizados los procedimientos y cada vez que se utilice.
-Los usuarios deben llenar el “Registro de Uso de Isofluorano” con los datos requeridos (nombre, grupo y tiempo de uso) cada vez que se utiliza el equipo.
-Los registros de recarga de isofluorano deben actualizarse.
-Cerrar el tanque de O2 después de usar el equipo.
Contactad con Jesús Campos (jesus.campos@umh.es) y Berta Lópz Sánchez-Laorden (berta.lopez@umh.es) cuando se esté acabando el depósito de O2.
Este servicio está ubicado en la sala 105 (primer piso).
(texto en English)
Common surgery equipment:
- Isofluorane and oxygen anesthesia system
- Anesthesia induction chamber
- Stereomicroscope and light source
- Heating blancket
- Minifugue for eppendorf tubes
- Waterbath
- Heating plate
- Fluorescence Estereomicroscope Leica MZ16FA (GFP and DsRed filters)
Electroporator in vivo Cuy21Edit
CUY21EDIT(Electroporator) can introduce DNAs, siRNAs, drugs, into tissues
including brain or embryos.
• General characteristics: -Voltage 1~500V -Pulse time
0.1~999.9ms -Pulse Interval 0.1~999.9ms -Pulse number 1~99 time(s) -Impedance
measurement ~18kO -Effective voltage 1~500V -Effective current 0.01~4.00
• Applications: In vivo, in utero, ex utero, in ovo, ex ovo,
ex vivo electroporation.
Vevo 3100 micro Ultrasound Imaging System
Ultrasonic imaging system adapted for use in small animals including mouse and
zebrafish. This system makes possible a high-resolution anatomical
visualization to perform cardiovascular, renal, reproductive system,
oncological or embryonic development studies in real time.
• General characteristics. Equipment includes:
-Microinjector
-Isofluorane anesthesia system
-MX201 transducer: 10-22 MHz, Centre Transmit: 15 MHz, Axial Resolution: 100
µm
-MX550D transducer: Centre Transmit: 40 MHz, Axial Resolution: 40 µm
• Applications:
Developmental biology:
-Gestation monitorization and determination of embryonic stage
-Analysis of placental structure and function
-Monitoring of organ development in the embryo
-Injection of viruses, cells or drugs into intra-uterine embryos: in the
brain, eye, spinal cord or any other developing organ
Oncology:
-Tumor detection and tumour burden quantification
-Visualization and quantification of tumour angiogenesis, vascularization and
perfusion
-Therapy responses (non invasive measure of tumors over time)
-Guided implantation of tumor cells
-Precise injection of drugs into tumors
-Ultrasound guided biopsy
Abdominal analysis:
-Function of kidneys, liver and reproductive system
Cardiovascular studies:
-Cardiac function in 2D, 3D or 4D
-Hemodynamics
IVIS Lumina XR
Real-Time in vivo bioluminescence, fluorescence & X-Ray Imaging System for
small animals.
• General characteristics:
– 10 filter sets to image reporters that emit from green to near-infrared
(capable of imaging all common fluorescent and bioluminescent reporters).
– Heated stage to keep animals from becoming hypothermic.
– Input and output connection ports for the anesthesia system.
– X-ray. Precise optical and X-ray overlay allows you to bring your optical
signal into.
• Applications:
The IVIS Lumina XR can be used in oncology research to follow tumor
progression, monitor response to therapeutic treatments, metastasis, cell
tracking, and tumor burden monitoring.
Other uses include: infectious disease, inflammation studies, metabolic
disease, neurology, gene therapy, stem cell biology, cardiovascular disease,
immunology, transplantation biology, and drug metabolism studies.
Esta área ofrece condiciones de alojamiento y espacios para realizar pruebas de comportamiento en ratas de laboratorio. La instalación está configurada para trabajar en ciclo de luz inverso controlado. La iluminación de luz roja con longitud de onda óptima para la experimentación con animales está disponible en toda la instalación.
El área cuenta con una sala de alojamiento que se encuentra junto a tres salas donde se pueden realizar experimentos de comportamiento. A la entrada del área se dispone de un vestuario donde los usuarios tienen acceso a los equipos de protección individual necesarios. La instalación cuenta con una sala para almacenamiento de insumos relacionados con el alojamiento de animales.
EQUIPO
- Condiciones de alojamiento controladas en racks ventilados
- 3 salas para pruebas de comportamiento
- 1 almacén
- 1 vestuario
- En esta área se requiere estrictamente trabajar en silencio.
- Está prohibido hablar por teléfono dentro de esta área, especialmente en las habitaciones de la vivienda.
- Los animales se alojan en ciclo inverso, por lo que se debe prestar extrema atención con el uso de luces blancas en esta área, para no interferir con los ciclos normales de la rata.
- Es obligatorio que los nuevos usuarios reciban una introducción al código de conducta y normas de organización de esta área experimental por parte del personal de la Instalación.
- Una vez que haya recibido esta capacitación, se activará su acceso seguro (tarjeta) y se le invitará al principal canal de comunicación para usuarios (Slack) y Google Calendar.
RESERVAS
La organización de los espacios se realiza a través de Slack y el calendario de Google de los usuarios. El acceso se proporcionará después del entrenamiento introductorio (ver reglas).
Responsable científico:
Sandra Jurado
–
Personal técnico
:
María Pérez
El servicio de cirugía ubicado en la sala 227 (2º piso) cuenta con un espacio dedicado y el equipamiento necesario para realizar intervenciones quirúrgicas en modelos animales murinos (ratas y ratones). El servicio se dedica principalmente a inyecciones intracraneales in vivo (inyecciones estereotáxicas) de partículas virales, pero también está disponible para inyecciones de células, fármacos, inyecciones intraperitoneales y microcirugías, entre otros procedimientos.
El servicio de cirugía ofrece los siguientes servicios:
- Sala equipada con mesa quirúrgica, estereoscopio y cámara de recuperación de animales con temperatura regulable
- Marco estereotáxico adaptable para ratones y ratas (Kopf) y accesorios
- Vaporizador de isoflurano
- Concentrador de oxígeno
La sala y el equipo se pueden reservar de forma independiente, ya que la mayoría de los equipos pueden ser retirados para realizar procedimientos en laboratorios individuales.
La reserva de la sala y el equipo debe realizarse a través de la intranet en:
acceso usuarios.
Hay que tener en cuenta que deben de hacerse reservas independientes para la sala (Cirugía) y el equipo requerido. Las opciones se enumeran a continuación:
- Cirugía
- Cirugía-concentrador de oxígeno
- Cirugía-Estereotáxico
- Cirugía-Isoflurano
Los nuevos usuarios deben ponerse en contacto con la Dra. Sandra Jurado: sjurado@umh.es para recibir una breve formación y familiarizarse con las pautas de uso. Este primer contacto es obligatorio para acceder al quirófano.
Para cualquier consulta o incidencia con la instalación, contactar con la Dra. Sandra Jurado: sjurado@umh.es.