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La Unidad de Cultivos Celulares y Esterilización es el servicio del Instituto de Neurociencias que proporciona a los investigadores el entorno para conseguir cultivos celulares sanos y viables. Este servicio está compuesto por tres Áreas diferenciadas y separadas espacialmente para la realización de diferentes tipos de cultivos celulares: Líneas Celulares, Cultivos Primarios y Cultivos Organotípicos.
Cada una de estas instalaciones está bien equipada con cabinas de flujo laminar clase I y/o clase II, incubadoras, microscopios de contraste de fase invertido y de fluorescencia y todo el material necesario para realizar técnicas especializadas de cultivo celular. Se incluyen áreas de bioseguridad nivel 2 para trabajar con material de alto riesgo (muestras humanas, virus). La Unidad también dispone de un sistema de nueva generación para el análisis cuantitativo en tiempo real de células vivas.
Servicios ofrecidos:
- Asesoramiento técnico para el cultivo de una gama de diferentes tipos de células.
- Capacitación y asistencia técnica en protocolos de cultivo celular y en el uso de todos los dispositivos y equipos provistos en las Instalaciones.
- Análisis de micoplasma de todas las células para garantizar que estén libres de contaminantes.
- Conservación de stocks de células congeladas en nitrógeno líquido.
- Mantenimiento de equipos y dispositivos.
- Preparación y esterilización de medios y material de precultivo.
- Lavado, esterilización y preparación de medios.
Sistema de criopreservación y purificación de agua de las unidades de Cultivo Celular:
Consideraciones generales de funcionamiento del servicio de Cultivo Celular y Esterilización:
- Las Áreas de Cultivo Celular son zonas altamente especializadas por lo que no se permitirán aglomeraciones de personas.
- El Investigador Principal es el responsable último del uso correcto del equipo de la Instalación por parte de cualquier miembro de su equipo.
- Todo usuario deberá comunicarse con el Supervisor de la Unidad para obtener la autorización para trabajar en la Unidad.
- Es obligatorio que los nuevos usuarios reciban la capacitación correspondiente antes de trabajar en la Unidad. Además, durante la primera sesión deben ser supervisados por un usuario experimentado o personal de la Instalación.
- Los usuarios deberán leer y conocer las instrucciones básicas para el correcto uso de cada equipo que manipule, así como las normas aplicables en cada caso.
- Las cabinas y equipos de bioseguridad se reservarán siempre a través del sistema establecido.
- Si una sesión reservada no se va a utilizar, se debe cancelar.
- Todo usuario que reserve un turno es responsable del equipo que utilice, debiendo mantener el área limpia y ordenada después de terminar.
- Si tiene alguna duda con respecto al uso de algún equipo, solicite ayuda al personal calificado.
- Las comunicaciones generales, consultas y modificaciones de reservas se establecerán preferentemente por correo electrónico a: in.cultivos@listas.umh.es
CULTIVOS CELULARES 237 -RESERVAS-
Las reservas de los equipos; lupas,microscopio fluorescencia (en caso de tiempos largos), disección y salas de cultivo , se realizarán a través de la intranet del Instituto de Neurociencias: Intranet
Incucyte se podrá reservar con un mes de antelación a través de intranet. Cabe la posibilidad de reservar el equipo varios usuarios a la vez pero para ello deberán ponerse en contacto para gestionar las reservas con: svega@umh.es
Tabla 1: Lista de precios (en €)
| Servicios | IN-UMH-CSIC | Org. Públicos | Org. Privados |
Soporte técnico y formación (h) |
27,6 € | 55,2 € | 82,8 € |
Uso Cabina (h) |
20 € | 40 € | 60 € |
Prueba de micoplasma (muestra) |
7,5 € | 15 € | 22,5 € |
Criopreservación en N2 (caja/mes) |
2,5 € | 5 € | 7,5 € |
Preparación de medios y alícuotas (h) |
14 € | 28 € | 42 € |
*precios sin IVA
La Unidad de Cultivo Celular se distribuye en tres áreas principales según el tipo de cultivo que vaya a realizar:
Sala 237. Cultivos Primarios
- Área de pre-cultivo
- Cuarto oscuro del microscopio de fluorescencia
- Sala de cultivo 1. Cultivos a largo plazo y adquisición de imágenes de células vivas (Incucyte)
- Sala de cultivo 2. Preparación de cultivos primarios
- Sala de cultivo 3. Preparación de cultivos primarios
- Sala de cultivo 4. Cultivos biopeligrosos (muestras humanas, infecciones por virus)
Sala 129. Líneas celulares
- Sala de cultivo 1. Cultivos biopeligrosos (muestras humanas, infecciones por virus) y microscopio de fluorescencia
- Sala de cultivo 2. Área de cuarentena
- Sala de cultivo 3. Cultivos de células madre
- Sala de cultivo 4. Mantenimiento de líneas celulares
- Área de pre-cultivo
Sala 111. Cultivos organotípicos
- Área de pre-cultivo
- Sala de cultivo 1. Preparación de cultivos organotípicos
- Sala de cultivo 2. Cultivos biopeligrosos (muestras humanas, infecciones por virus)
Área de Criopreservación
- Contenedores de llenado manual (tres)
- Contenedor automático de fase de vapor
Las comunicaciones generales, consultas, consultas de citas y solicitudes de formación se establecerán preferentemente por correo electrónico a: in.cultivos@umh.es
(texto en English)
Cell Culture Unit is provided with all the equipment needed to perform all the different types of cell cultures: Primary, Organotypic and Cell Lines cultures.
We have the following equipment distributing throughout the different Areas:
• Vertical flow cabinets (lab 111, 129, 237)
Biological safety cabinets to obtain delimited areas of clean and sterile air with recirculation of 70% of the air volume. These can be used when it is necessary to ensure the absence of contamination of the product during its manipulation. It provides a high protection of the operator and the environment.
• Horizontal flow cabinets (lab 111, 237)
Horizontal laminar flow cabinets when it is necessary to ensure the absence of contamination of the product during its manipulation, not being necessary to protect the operator and the environment. Examples: primary cultures free from pathogens.
• Incubators (lab 111, 129, 237)
Incubators with a strict control of both, temperature and CO2, to provide optimal growth conditions for cell cultures of different nature. All have self-sterilization programs to ensure their correct cleaning to avoid any kind of contamination.
• Microscopes (lab 111, 129, 237)
Inverted microscopes to observe cell cultures by fluorescence and bright field illumination. Fluorescence microscopes have filter cubes for DAPI, GFP and RFP and dry objectives of, 10x, 20x and 40x, and there is one per area. Those in labs 129 and 237 have coupled cameras to monitor the cultures.
• Stereo microscopes (lab 111, 237)
Several stereo microscopes are available to dissect tissues in order to stablish Primary and Organotypic cultures.
• Centrifuges (lab 111, 129, 237)
Refrigerated centrifuges with swing-bucket rotor for 15 and 50ml tubes, and centrifuges with fix rotor for 1,5 and 2ml.
• Vibratome (lab 111)
Vibrating blade microtome Leica VT1000S to obtain sections from fresh tissue to culture it.
• UV sterilizer (lab 111)
Equipment to sterilize, throug UV, surgical and small material necessary to stablish primary cell cultures.
• Water baths (lab 111, 129, 237)
To warm culture media and solutions.
• Fridges and freezers (lab 111, 129, 237)
To preserve media and solutions necessary for cell cultures maintenance.
• IncuCyte system (lab 237 room 1)
Live-cell imaging acquisition equipment that enables automated quantification of cell behavior over time, and it includes a platform to analyze different cell functions (proliferation, migration, apoptosis, proteins internalization, etc). In vivo images can be taken both in bright field and fluorescence (DAPI, GFP and RFP).
https://www.essenbioscience.com/en/resources/incucyte-zoom-resources-support/
• Cryopreservation containers (loading dock)
The Unit has liquid nitrogen containers to keep our cell lines in optimal conditions during time.
One vapor phase container (automatic filling) and three in liquid phase (manual filling) are available.