Experimentación animal

Información general sobre las Salas de Comportamiento:

1. Todas las habitaciones deben ser reservadas a través de INTRANET antes de su uso. Las habitaciones se pueden reservar en bloques (8:00 a 14:00 y 14:00 a 20:00). Las reservas pueden ser de hasta 4 semanas en algunas de las salas: por ejemplo, la sala E4 se puede reservar durante 1 mes completo debido a la duración prolongada de las pruebas del laberinto de Morris Water. Este esquema se revisará en función de las demandas de los usuarios. Para consultas específicas o reservas que no se ajusten a la duración/requisitos indicados, contactar directamente con el responsable científico: otano@umh.es

2. Para trabajar en el servicio hay que estar dado de alta en el siguiente listado:

in.zona-experimental.rmg@listas.umh.es.

Para cualquier consulta, liberación de salas o ayuda en el área experimental escribir al e-mail: in.zona-experimental.rmg@listas.umh.es

3. El RUIDO perturba los experimentos de otras personas. No hable en los pasillos y realice todos los trámites con las puertas cerradas.

4. NO se debe utilizar el teléfono del almacén (x9358), excepto para la comunicación imprescindible entre las personas que trabajan en el área experimental y el exterior, pero no al revés.

5. Los teléfonos celulares NO ESTÁN PERMITIDOS

6. Todo uso y pequeña incidencia deberá registrarse en la hoja de Incidencias situada en cada habitación o a este correo electrónico :zona-experimental.rmg@listas.umh.es. Las incidencias mayores, como daños o mal funcionamiento del equipo o del software, problemas de ruido y problemas de temperatura, deben consultarse directamente con el responsable científico: otano@umh.es

7. Los usuarios deben asegurarse de que la habitación y el equipo estén en orden y limpios después de su uso.

8. Si los materiales comunes (guantes, papel toalla, líquidos de limpieza, etc.) están próximos a terminarse, informe al personal de la instalación a cargo de su reposición.

9. Algunos equipos DEBEN PERMANECER EN habitaciones específicas. El resto se guarda en el almacén y se traslada a las salas 1, 3, 4 y 7 para su uso. Después de su uso, el equipo debe limpiarse cuidadosamente y devolverse al almacén, excepto cuando deba usarse al día siguiente. Está prohibido cambiar la ubicación de los equipos asociados a una sala específica sin autorización del responsable científico.

ORDENADORES

Todos los equipos están conectados al dominio UMHNET. Para iniciar sesión hay que seleccionar UMHNET en la casilla “Conectar a”, y utilizar el “nombre de usuario” y la “contraseña” que utilizamos para conectarnos a nuestro correo electrónico y otros ordenadores del instituto.
Los archivos creados deben transferirse electrónicamente a ordenadores externos (por correo electrónico, google drive, dropbox, etc.). Debido a que tenemos espacio limitado en el disco duro de la computadora, elimine todos los archivos una vez que se hayan enviado y se puedan leer desde otros ordenadores.

INVENTARIO DEL EQUIPAMIENTO:

(texto en English)

Housing area
2 parks for enriched environment (please ask Angel Barco, abarco@umh.es if you need to use them)

Room Comp E2. Sensory and motor testing
1. Hot/Cold Plate
2. Plantar Test (Hargreaves Apparatus)
3. Von Frey
4. RotaRod
5. Activity wheel
6. Treadmill (2 lanes)

Room Comp E3 and Room 7:
Video Tracking Smart license (Panlab) (one in each room) with computer and camera associated.

Room Comp E4:
Morris water-maze (2 m diameter) SMART Video tracking (Panlab) for the Water maze.

Room Comp E5:
1. Startle and fear conditioning boxes (X2) with computer and software Panlab associated.
2. Skinner Operant boxes. (x4)

Room Comp E6:
Phenotyper (Ethovision Noldus)

Testing apparatus in Store Room
1. Radial arm maze
2. T-maze
3. Y-maze
4. Open field boxes (50x50cm)
5. Elevate plus maze
6. Wireless running Wheels (x8)
7. Intelligent cages
8. Light-dark boxes
9. Passive avoidance
10. Tail Suspension
12. Forced swiming test
13. Conditioned Place Preference/Aversion boxes (x2)
14. Catwalk

SHIRPA kit:
1. Viewing jar (10 x 20 cm clear perspex glass cilinder)
2. Clear perspex glass sheet (the base for the viewing jar)
3. Metal grid (for measuring visual placing, negative geotaxis and grip strength)
4. Vertical pole wrapped with yellow tape (for vertical pole test)
5. Rod (for measuring provoked biting)
6. Forceps (for measuring toe pinch)
7. Von-frey hair attached to a wooden stick (for measuring corneal and pinna reflexes)
8. Clear persplex glass 5×30 cm cilinder (for measuring contact righting reflex)
9. White perspex glass box with attached wire (for measuring wire manoeuvre)
10. Electronic balance (for weight measurement)
11. Small dynamometer to measure strength
12. Stop watch
13. One or two wheeled tables.
14. Moving staircase.

(texto en English)

Cryopreservation offers the opportunity of archiving valuable laboratory mice strains such as inbred or genetically modified mice, slowing down the onset of genetic drift and insuring them against any natural or sanitary disaster, mismanagement, reproductive problem, or transgene silencing expression.

The use of cryopreservation in this area also represents a good opportunity to apply the 3Rs policies, since on the one hand is an indirect method of reduction by avoiding the loss of these lines and therefore avoiding a new investment of animals in its creation, but on the other hand offers the possibility of directly reducing the number of animals used in research by archiving and eliminating strains that are kept alive but nevertheless are not being used. In this sense, cryopreservation is also a mechanism that makes possible the good management of the animal facilities since the elimination of obsolete lines is cost-effective (Table 1) and not only reduces the total maintenance costs of animals, but releases space that is being wasted and could be used by other developing research lines.

In short, cryopreservation prevents us from losing our model, ensures its quality, is an opportunity to apply the 3Rs and reduce the number of animals used in research, and is also advisable from an economic and management point of view.

Table 1. Ratio of Laboratory mice strains maintenance costs depending on whether they are kept alive or cryopreserved.

El Servicio de Transgénicos del Instituto de Neurociencias CSIC-UMH proporciona apoyo a investigadores para la generación y establecimiento de modelos de ratón modificados genéticamente. Nuestro equipo ofrece asesoramiento técnico sobre la mejor estrategia para conseguir el modelo deseado mediante transgénesis aditiva o mutagénesis dirigida.

El laboratorio está ubicado dentro de una barrera SPF y el trabajo se realiza en condiciones asépticas, asegurando el mejor estado sanitario para las nuevas cepas generadas.

Técnico responsable: Gonzalo Moreno Del Val
email: g.moreno@umh.es »

Técnico: Patricia Muñoz Robledano
email: pmunoz@umh.es »

Transgénicos y Criopreservación
Instituto de Neurociencias
Universidad Miguel Hernández – CSIC
Campus de San Juan
Sant Joan d’Alacant
Alicante | España

Tel. + 34 965 23 37 00
(ext. servicio 9371 / 9408)
Fax + 34 965 91 95 61

• Es obligatorio que los nuevos usuarios reciban la formación correspondiente por parte del personal de la Instalación antes de utilizar cualquiera de estos equipos.
• El área de trabajo debe mantenerse siempre limpia, especialmente después de finalizar la sesión.

Este servicio está ubicado en el piso sótano del IN y está dividido en:

• Sala de operaciones 1
• Sala de operaciones 2

(texto en English)

Electroporator CUY21 SC. Nepa Gene

The CUY21 SC can measure the electric current from the low ampere (1mA) up to 1.60A. The CUY21 SC was developed for the electroporation of genetic constructs that are delivered into the sensitive target region such as mouse’s brain, tissue slices and embryos (chick, mouse). The CUY21 SC can be used with different NEPA GENE’s CUY series electrodes to perform a wide range of electroporation experiments. In our animal house there are the CUY650P3 and CUY650P5 Tweezers w/3mm or 5mm diameter platinum disk electrode (Nepa Gene Co., Ltd.)

Estereotaxic Stoelting 51730

Carry a basic stereotaxic frame, together with all the usual accessories. Precision alignment ensures accurate placement of electrodes, micropipettes, and other devices. Is ideal for researchers in need of a versatile, reliable instrument for stereotaxic procedures with mice and other small rodents.

Nano injector. NANOLITER 2010-WPI

The Nanoliter Injector offers significant options and controls ideal for ultra-delicate work with oocytes, embryos, and tissues. Injection volumes range between 2.3 nanoliters and 69.0 nanoliters in 16 selectable increments.

Vetario TS INTENSIVE CARE UNITS

Designed for helping the recovery of mice after an experimental procedure. It avoids the hypothermia, shock and other complications derived from the experimental procedure performed.

Este servicio está ubicado en la sala 105 (primer piso).

(texto en English)

Common surgery equipment:

• Isofluorane and oxygen anesthesia system
• Anesthesia induction chamber
• Stereomicroscope and light source
• Heating blancket
• Minifugue for eppendorf tubes
• Waterbath
• Heating plate
• Fluorescence Estereomicroscope Leica MZ16FA (GFP and DsRed filters)

Electroporator in vivo Cuy21Edit

CUY21EDIT(Electroporator) can introduce DNAs, siRNAs, drugs, into tissues including brain or embryos.
• General characteristics: -Voltage 1~500V -Pulse time 0.1~999.9ms -Pulse Interval 0.1~999.9ms -Pulse number 1~99 time(s) -Impedance measurement ~18kO -Effective voltage 1~500V -Effective current 0.01~4.00
• Applications: In vivo, in utero, ex utero, in ovo, ex ovo, ex vivo electroporation.

Vevo 3100 micro Ultrasound Imaging System

Ultrasonic imaging system adapted for use in small animals including mouse and zebrafish. This system makes possible a high-resolution anatomical visualization to perform cardiovascular, renal, reproductive system, oncological or embryonic development studies in real time.
• General characteristics. Equipment includes:
-Microinjector
-Isofluorane anesthesia system
-MX201 transducer: 10-22 MHz, Centre Transmit: 15 MHz, Axial Resolution: 100 µm
-MX550D transducer: Centre Transmit: 40 MHz, Axial Resolution: 40 µm
• Applications:
Developmental biology:
-Gestation monitorization and determination of embryonic stage
-Analysis of placental structure and function
-Monitoring of organ development in the embryo
-Injection of viruses, cells or drugs into intra-uterine embryos: in the brain, eye, spinal cord or any other developing organ
Oncology:
-Tumor detection and tumour burden quantification
-Visualization and quantification of tumour angiogenesis, vascularization and perfusion
-Therapy responses (non invasive measure of tumors over time)
-Guided implantation of tumor cells
-Precise injection of drugs into tumors
-Ultrasound guided biopsy
Abdominal analysis:
-Function of kidneys, liver and reproductive system
Cardiovascular studies:
-Cardiac function in 2D, 3D or 4D
-Hemodynamics

IVIS Lumina XR

Real-Time in vivo bioluminescence, fluorescence & X-Ray Imaging System for small animals.
• General characteristics:
– 10 filter sets to image reporters that emit from green to near-infrared (capable of imaging all common fluorescent and bioluminescent reporters).
– Heated stage to keep animals from becoming hypothermic.
– Input and output connection ports for the anesthesia system.
– X-ray. Precise optical and X-ray overlay allows you to bring your optical signal into.
• Applications:
The IVIS Lumina XR can be used in oncology research to follow tumor progression, monitor response to therapeutic treatments, metastasis, cell tracking, and tumor burden monitoring.
Other uses include: infectious disease, inflammation studies, metabolic disease, neurology, gene therapy, stem cell biology, cardiovascular disease, immunology, transplantation biology, and drug metabolism studies.

• En esta área se requiere estrictamente trabajar en silencio.
• Está prohibido hablar por teléfono dentro de esta área, especialmente en las habitaciones de la vivienda.
• Los animales se alojan en ciclo inverso, por lo que se debe prestar extrema atención con el uso de luces blancas en esta área, para no interferir con los ciclos normales de la rata.
• Es obligatorio que los nuevos usuarios reciban una introducción al código de conducta y normas de organización de esta área experimental por parte del personal de la Instalación.
• Una vez que haya recibido esta capacitación, se activará su acceso seguro (tarjeta) y se le invitará al principal canal de comunicación para usuarios (Slack) y Google Calendar.
• Para recibir esta formación escríbenos un e-mail a:  cmarquez@umh.es

RESERVAS

La organización de los espacios se realiza a través de Slack y el calendario de Google de los usuarios. El acceso se proporcionará después del entrenamiento introductorio (ver reglas).

EQUIPOS

Director científico: Cristina Márquez Vega
email: cmarquez@umh.es »

 More information

El servicio de cirugía ofrece los siguientes servicios:

• Sala equipada con mesa quirúrgica, estereoscopio y cámara de recuperación de animales con temperatura regulable
• Marco estereotáxico adaptable para ratones y ratas (Kopf) y accesorios
• Vaporizador de isoflurano
• Concentrador de oxígeno

La sala y el equipo se pueden reservar de forma independiente, ya que la mayoría de los equipos pueden ser retirados para realizar procedimientos en laboratorios individuales.

La reserva de la sala y el equipo debe realizarse a través de la intranet en: acceso usuarios.
Hay que tener en cuenta que deben de hacerse reservas independientes para la sala (Cirugía) y el equipo requerido. Las opciones se enumeran a continuación:

• Cirugía
• Cirugía-concentrador de oxígeno
• Cirugía-Estereotáxico
• Cirugía-Isoflurano

Los nuevos usuarios deben ponerse en contacto con la Dra. Sandra Jurado: sjurado@umh.es para recibir una breve formación y familiarizarse con las pautas de uso. Este primer contacto es obligatorio para acceder al quirófano.

Para cualquier consulta o incidencia con la instalación, contactar con la Dra. Sandra Jurado: sjurado@umh.es.